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信号通路
英文名称: Rat N-terminal mid-segment osteocalcin(N-MID-OT) ELISA Kit
别名: N-MID-OT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 62.5-4000pg/mL
灵敏度: 31.6pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
骨钙素又称骨R-羟基谷氨酸蛋白(R-hydroxy glutamic acid protein,GLa蛋白),是一种由49个氨基酸组成的蛋白质。它属于非胶原酸性糖蛋白,是一种维生素K依赖性钙结合蛋白。它主要由成骨细胞、成牙质细胞合成,还有一些由增生的软骨细胞合成,在非羧化形式下,骨钙素在体内起着激素的作用,在胰腺、脂肪、肌肉、睾丸和大脑中发出信号,它在调节骨钙代谢中起重要作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠N端中段骨钙素(N-MID-OT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠N端中段骨钙素(N-MID-OT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的N-MID-OT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
2.15
1.63
1.13
0.71
0.5
0.33
0.23
0.07
校正OD 值
2.06
1.54
1.04
0.62
0.24
0.24
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠N-MID-OT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.5
95.30
血浆(n=8)
92.7-106.8
103.70
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.6
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠N-MID-OT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.8
91.30
88.8-95.0
93.30
90.2-110.7
95.50
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.3
95.10
87.4-108.6
98.70
105.4-114.8
107.20
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