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信号通路
英文名称: Rat Klotho (KL) ELISA Kit
别名: Klotho
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 15.7pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
克洛素(Klotho)为一种跨膜蛋白,会调控生物体对于胰岛素的敏感性。它具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性,可以水解β-葡萄糖醛酸。β-克洛素会与FGF受体行程协同受体,可与FGF19、FGF20、FGF23等成纤维细胞生长因子(FGF)结合进行作用。克洛素的作用机转迄今未明,目前已知可以透过提升TRPV5和降低TRPC6的表达调控细胞的钙平衡。此外,克洛素也会增加内向整流离子通道ROMK的表达。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠Klotho蛋白(Klotho)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠Klotho蛋白(Klotho)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Klotho, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
2
1.64
1.22
0.84
0.5
0.34
0.25
0.09
校正OD 值
1.91
1.55
1.13
0.75
0.25
0.25
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Klotho , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-102.1
96.20
血浆(n=8)
92.2-106.6
103.90
组织匀浆(n=8)
96.0-108.5
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度大鼠Klotho , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.6
91.50
87.2-96.0
92.90
90.0-110.1
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.0
94.50
87.0-108.0
98.80
105.0-114.0
107.90
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