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信号通路
英文名称: Rat Type IV collagenase (IV-C) ELISA Kit
别名: Ⅳ-C
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胶原酶是一种蛋白酶，由长度约为1,000个氨基酸残基的单多肽链组成。胶原酶能够消化结缔组织中常见的原生胶原蛋白纤维，因此经常被用于组织解离。胶原酶制剂含有几种蛋白酶的活性，包括胶原蛋白酶、酪蛋白酶、梭状蛋白酶和胰蛋白酶（Kessler & Yaron）。IV型胶原蛋白酶含有低水平的胰蛋白酶活性，经常用于胰岛（Taguchi等）和需要维持受体完整性的应用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠Ⅳ型胶原酶(Ⅳ-C)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠Ⅳ型胶原酶(Ⅳ-C)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Ⅳ-C, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.47
1.73
1.04
0.57
0.36
0.22
0.17
0.09
校正OD 值
2.38
1.64
0.95
0.48
0.13
0.13
0.08
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Ⅳ-C , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.7-101.0
96.60
血浆(n=8)
92.6-106.7
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.4
105.40
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠Ⅳ-C , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.4
91.10
89.0-96.8
93.20
90.4-110.2
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.8
94.30
87.0-108.2
98.70
105.1-113.7
108.20
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