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信号通路
英文名称: Rat Pre-collagen type III (PC III) ELISA Kit
别名: PC Ⅲ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 2.5-160ng/mL
灵敏度: 1.62ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Ⅲ型前胶原(PCⅢ)是一种由成纤维细胞、平滑肌细胞等合成的蛋白质前体,其核心功能是参与细胞外基质(ECM)的胶原纤维形成。作为Ⅲ型胶原的前体,PCⅢ在细胞内合成后被分泌至细胞外,经内切酶切割后转化为具有三螺旋结构的Ⅲ型胶原,进而交联形成胶原纤维。PCⅢ在临床中是评估肝纤维化程度的关键指标。其血清水平与肝纤维化程度呈正相关,尤其在肝纤维化早期,PCⅢ率先升高,成为诊断肝纤维化的敏感标志物。持续升高的PCⅢ提示肝脏纤维化处于活动期,但肝硬化晚期时其水平可能因合成率降低而下降。此外,PCⅢ也可用于监测其他器官的纤维化进程,如肺纤维化、肾纤维化等。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PC Ⅲ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
160
80
40
20
10
5
2.5
0
OD值
2.47
1.73
1.04
0.57
0.36
0.22
0.17
0.09
校正OD 值
2.38
1.64
0.95
0.48
0.13
0.13
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PC Ⅲ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.6
96.60
血浆(n=8)
92.6-105.2
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.4
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠PC Ⅲ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.6
91.30
88.0-96.1
93.80
90.4-110.7
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.4
94.60
87.7-108.9
98.60
105.1-115.6
108.70
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