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信号通路
英文名称: Rat G-protein coupled receptor 109A(GPR109A) ELISA Kit
别名: GPR109A
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.74ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
羟基羧酸受体 2,也称为烟酸受体 1 和 GPR109A,是由 HCAR2 基因编码的 蛋白质。与其他羟基羧酸受体 HCA 1 和 HCA 1 一样,HCA 2 是 Gi / o 偶联 的 G 蛋白偶联受体。HCA 2 的主要内源性激动剂是 D-β-羟基丁酸和丁酸。 HCA 2 也是烟酸的高亲和力生物分子靶标。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠G蛋白偶联受体109A(GPR109A)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠G蛋白偶联受体109A(GPR109A)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的GPR109A, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.23
1.79
1.27
0.8
0.51
0.32
0.22
0.12
校正OD 值
2.14
1.7
1.18
0.71
0.23
0.23
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠GPR109A , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.5-101.2
96.70
血浆(n=8)
92.9-105.9
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.9
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠GPR109A , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.0
91.20
88.9-96.7
93.50
90.1-110.7
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.9
94.70
87.3-108.1
98.10
105.9-115.6
108.10
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