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信号通路
英文名称: Rat V-Ha-Ras Harvey Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog (HRAS) ELISA Kit
别名: Hras
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.1-5000pg/mL
灵敏度: 40pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
GTP 酶 HRas，也被称为转化蛋白 p21，是一种由 HRAS 基因编码的酶。HRAS基因位于 11 号染色体短（p）臂的 15.5 位，从碱基对 522,241 到碱基对525,549。HRas 是 Ras 超家族小 GTP 酶的 Ras 亚家族中的一个小 G 蛋白。一旦与三磷酸鸟苷结合，H-Ras 将激活像 c-Raf 这样的 Raf 激酶，这是MAPK/ERK 途径的下一个步骤。GTP 酶 HRas 参与调控细胞分裂以应对生长因子的刺激。生长因子通过结合横跨细胞质膜的细胞表面受体而发挥作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠GTP酶Hras(Hras)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠GTP酶Hras(Hras)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Hras, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.2
78.1
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Hras , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.5-101.4
96.20
血浆(n=8)
92.5-105.6
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.2
105.10
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠Hras , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.6
91.90
88.5-96.6
93.30
90.6-110.6
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.3
94.80
87.4-108.1
98.50
105.2-115.8
108.90
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