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信号通路
英文名称: Rat Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L) ELISA Kit
别名: CD40L
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.1ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
CD154，也叫CD40配体或CD40L，是一种主要在活化的T细胞上表达的蛋白质，是TNF超家族分子的一员。它与抗原呈递细胞（APC）上的CD40（蛋白）结合，根据目标细胞类型的不同，导致许多影响。CD40L总共有三个结合伙伴：CD40、α5β1整合素和αIIbβ3。在TFH细胞上，CD154通过与B细胞表面的CD40结合，促进B细胞的成熟和功能，从而促进细胞与细胞之间的交流。该基因的缺陷导致无法进行免疫球蛋白类别转换，并与高IgM综合征有关。CD154的缺失也会阻止生殖中心的形成，因此禁止抗体亲和力成熟，这是适应性免疫系统的一个重要过程。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠CD40配体(CD40L)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠CD40配体(CD40L)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的CD40L, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.24
1.63
1.01
0.55
0.44
0.31
0.25
0.09
校正OD 值
2.15
1.54
0.92
0.46
0.22
0.22
0.16
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠CD40L , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.8-101.0
96.80
血浆(n=8)
92.7-105.6
102.50
组织匀浆(n=8)
96.3-108.6
105.10
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度大鼠CD40L , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.7
91.30
88.1-96.7
93.90
90.2-110.1
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.0
94.50
87.8-108.8
97.80
105.5-115.2
108.90
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