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信号通路
英文名称: Rat Cluster Of Differentiation 14 (CD14) ELISA Kit
别名: CD14
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 62.5-4000pg/mL
灵敏度: 28.25pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
CD14(分化簇14)是一种蛋白质,主要由巨噬细胞制造,是先天免疫系统的一部分。它通过结合脂多糖(LPS),一种病原体相关分子模式(PAMP),帮助探测体内的细菌。CD14以两种形式存在,一种是通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)的尾巴固定在膜上(mCD14),另一种是可溶性的形式(sCD14)。可溶性CD14要么在mCD14脱落后出现(48 kDa),要么直接从细胞内囊泡分泌(56 kDa)。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠CD14分子(CD14)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠CD14分子(CD14)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的CD14, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
2.11
1.28
0.71
0.4
0.3
0.22
0.18
0.08
校正OD 值
2.02
1.19
0.62
0.31
0.13
0.13
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠CD14 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.4
96.40
血浆(n=8)
92.3-105.5
102.50
组织匀浆(n=8)
96.2-108.4
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度大鼠CD14 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.0
91.40
88.7-97.7
93.40
90.0-110.0
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.7
94.40
87.9-108.7
98.20
105.2-115.5
108.10
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