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信号通路
英文名称: Rat AKT protein (AKT) ELISA Kit
别名: AKT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.073ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白激酶B(PKB),又称Akt,是一组三个丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶的总称,在多个细胞过程中发挥关键作用,如葡萄糖代谢、细胞凋亡、细胞增殖、转录和细胞迁移。三个不同的基因编码蛋白激酶B异构体的基因被称为AKT1、AKT2和AKT3,分别编码RAC α、β和γ丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。术语PKB和Akt可能是指所有三个基因的统称,但有时也用来单独指PKB alpha和Akt1。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠AKT蛋白(AKT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠AKT蛋白(AKT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的AKT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.2
1.65
1.16
0.8
0.54
0.37
0.28
0.09
校正OD 值
2.11
1.56
1.07
0.71
0.28
0.28
0.19
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠AKT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.3-105.0
102.30
细胞裂解液(n=8)
96.8-107.0
104.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠AKT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.2
91.70
90.9-110.2
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.2
94.70
105.3-115.2
108.10
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