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信号通路
英文名称: Guinea Pig Interleukin 5 (IL-5) ELISA Kit
别名: IL-5
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.81-500pg/mL
灵敏度: 3.8pg/mL
种属: 豚鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素5(IL5)是一种由2型T辅助细胞和肥大细胞产生的白细胞介素。通过与白细胞介素-5受体结合,白细胞介素5刺激B细胞生长并增加免疫球蛋白的分泌--主要是IgA。它也是嗜酸性粒细胞激活的一个关键媒介。IL-5是一种115个氨基酸的TH2细胞因子,是造血家族的一部分。与该细胞因子家族的其他成员(即白细胞介素3和GM-CSF)不同,这种糖蛋白在其活性形式中是一个同源二聚体。IL-5基因与编码IL-3、IL-4和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的基因相邻,这些基因经常在TH2细胞中共同表达。白细胞介素-5也由嗜酸性粒细胞表达,并通过免疫组化法在哮喘气道的肥大细胞中观察到。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有豚鼠白细胞介素5(IL-5)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的豚鼠白细胞介素5(IL-5)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中豚鼠的IL-5, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.25
15.62
7.81
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康豚鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的豚鼠IL-5 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.0
96.30
血浆(n=8)
92.9-105.9
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.5
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康豚鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度豚鼠IL-5 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.1
91.40
88.5-96.8
93.20
90.4-110.7
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.8
94.50
87.0-108.1
98.20
105.1-115.4
108.80
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