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信号通路
英文名称: protein G(protein G)
别名: protein G
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.72ng/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白 G 是一种在 C 组和 G 组链球菌中表达的免疫球蛋白结合蛋白,与蛋白 A 很相似,但具有不同的结合特异性。它是一种约 60 kDA(菌株 G148 为 65 kDA,菌株 C40 为 58 kDa)的细胞表面蛋白,通过与 Fab 和 Fc 区域结合,可用于纯化抗体。原生分子也能与白蛋白结合,但由于血清白蛋白是抗体来源的主要污染物,重组形式的蛋白 G 已去除白蛋白结合位点。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有蛋白G(protein G)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的蛋白G(protein G)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的protein G, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.11
1.26
0.8
0.5
0.33
0.24
0.19
0.08
校正OD 值
2.02
1.17
0.71
0.41
0.15
0.15
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的protein G , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
88.7-102.0
97.90
血浆(n=8)
94.6-107.0
103.40
细胞培养上清(n=8)
96.1-110.8
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康血清血浆细胞培养上清中加入高浓度protein G , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
82.0-93.2
91.90
88.2-96.6
93.20
90.4-110.7
97.10
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.7
94.20
87.1-110.9
98.60
105.1-115.8
109.10
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