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信号通路
英文名称: Monkey Interferon Alpha (IFNa) ELISA Kit
别名: IFN-α
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1,000pg/mL
灵敏度: 7.6pg/mL
种属: 猴
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
干扰素α(INN)或HuIFN-α-Le,商品名Multiferon,是一种由天然干扰素α(IFN-α)组成的药物,是用仙台病毒诱导后从血液的白细胞部分获得的。干扰素α含有几种天然存在的IFN-α亚型,并通过亲和层析法进行纯化;且含有几种蛋白质的混合物,都具有天然干扰素α(IFN-α)的典型结构、血清学和功能特性。已确定的主要亚型是IFN-α1、IFN-α2、IFN-α8、IFN-α10、IFN-α14和IFN-α21。其中,IFN-α2和IFN-α14是糖基化的。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有猴α干扰素(IFN-α)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的猴α干扰素(IFN-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中猴的IFN-α, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.15
1.72
1.4
1
0.67
0.48
0.33
0.1
校正OD 值
2.06
1.63
1.31
0.91
0.39
0.39
0.24
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康猴血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的猴IFN-α , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.2
96.90
血浆(n=8)
92.3-105.1
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.1
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康猴血清血浆细胞培养上清中加入高浓度猴IFN-α , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.8
90.50
88.9-96.8
93.60
90.3-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.2
94.80
87.9-108.2
98.70
105.9-115.0
108.90
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