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信号通路
英文名称: Pig Trypsin (TRY) ELISA Kit
别名: Trypsin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.54ng/mL
种属: 猪
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胰蛋白酶是一种来自PA家族超家族的丝氨酸蛋白酶,存在于许多脊椎动物的消化系统中,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸。胰蛋白酶在小肠中形成时,其酶原形式,即胰腺产生的胰蛋白酶原被激活。胰蛋白酶主要在氨基酸赖氨酸或精氨酸的羧基侧切割肽链。胰蛋白酶由Wilhelm Kühne于1876年发现,并从古希腊语中的摩擦词命名,因为它最初是通过用甘油摩擦胰腺而分离出来的。在十二指肠中,胰蛋白酶催化肽键的水解,将蛋白质分解成更小的肽。然后肽产物通过其他蛋白酶进一步水解成氨基酸,使它们可被吸收到血流中。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有猪胰蛋白酶(Trypsin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的猪胰蛋白酶(Trypsin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中猪的Trypsin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.39
1.48
0.86
0.51
0.32
0.23
0.18
0.07
校正OD 值
2.3
1.39
0.77
0.42
0.14
0.14
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康猪血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的猪Trypsin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.5
96.60
血浆(n=8)
92.6-105.6
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.7
104.80
线性稀释:分别在选取的4份健康猪血清血浆细胞培养上清中加入高浓度猪Trypsin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.0
90.40
88.0-96.0
92.40
90.9-110.2
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.4
94.80
87.7-108.6
98.20
105.8-115.4
108.50
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