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信号通路
英文名称: Rabbit Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) ELISA Kit
别名: TNF-α
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200pg/mL
灵敏度: 1.6pg/mL
种属: 兔
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肿瘤坏死因子（TNF，cachexin；通常称为肿瘤坏死因子α或TNF-α）是一种脂肪因子和一种细胞因子。TNF是TNF超家族的一个成员，它由各种具有同源TNF结构域的跨膜蛋白组成。作为一种脂肪因子，TNF促进胰岛素抵抗。作为一种细胞因子，它被免疫系统用于细胞信号传递。如果巨噬细胞（某些白血球）检测到感染，它们会释放TNF以提醒其他免疫系统细胞，作为炎症反应的一部分。TNF-α以跨膜形式（mTNF-α）和可溶性形式（sTNF-α）存在。sTNF-α由mTNF-α的酶裂解产生。sTNF-α选择性地与TNFR1结合，而mTNF-α同时与TNFR1和TNFR2结合。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有兔肿瘤坏死因子α(TNF-α)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的兔肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中兔的TNF-α, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康兔血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的兔TNF-α , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.5-101.1
96.20
血浆(n=8)
92.7-105.3
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.6
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康兔血清血浆细胞培养上清中加入高浓度兔TNF-α , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.5
91.10
88.7-96.1
93.20
90.3-110.2
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.8
94.10
87.5-108.9
98.20
105.4-115.7
108.50
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