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信号通路
英文名称: Rabbit Interleukin 6 (IL6) ELISA Kit
别名: IL-6
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200pg/mL
灵敏度: 1.58pg/mL
种属: 兔
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素-6(IL-6)是一种多功能蛋白,在宿主防御、急性期反应、免疫反应和造血中发挥重要作用。IL-6由各种正常和转化的细胞表达,包括T细胞、B细胞、单核细胞/巨噬细胞、成纤维细胞、肝细胞、角质细胞、星形细胞、血管内皮细胞和各种肿瘤细胞。IL-6的产生被许多信号上调,包括有丝分裂或抗原刺激、LPS、钙离子团、IL-1、IL-2、IFN、TNF、PDGF和病毒。IL-6在单核细胞中的表达受到IL-4和IL-13的抑制。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有兔白细胞介素6(IL-6)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的兔白细胞介素6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中兔的IL-6, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.36
1.34
0.8
0.48
0.34
0.26
0.22
0.09
校正OD 值
2.27
1.25
0.71
0.39
0.17
0.17
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康兔血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的兔IL-6 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.4
96.40
血浆(n=8)
92.2-105.6
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.3
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康兔血清血浆细胞培养上清中加入高浓度兔IL-6 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.9
91.90
88.2-96.0
93.80
90.4-110.5
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.2
94.50
87.0-108.0
98.20
105.1-115.8
108.50
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