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信号通路
英文名称: Rabbit Interleukin 4 (IL4) ELISA Kit
别名: IL-4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.6pg/mL
种属: 兔
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素4(IL-4)是一种多效应细胞因子,主要由嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和Th2细胞等多种细胞分泌,在许多细胞中均能够发挥免疫调节功能。IL-4作为B细胞的激活因子,其能够调解B细胞表面免疫球蛋白的分型转换,尤其是IgG和IgE之间的转换。IL-4还能够调控前体辅助T细胞向Th2亚型分化。IL-4与TNF-α协同作用能够诱导血管内皮细胞和平滑肌细胞表面VCAM-1的表达,从而选择性招募嗜酸性粒细胞和淋巴细胞到达炎症部位。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有兔白细胞介素4(IL-4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的兔白细胞介素4(IL-4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中兔的IL-4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.02
1.22
0.75
0.47
0.3
0.22
0.18
0.08
校正OD 值
1.93
1.13
0.66
0.38
0.13
0.13
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康兔血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的兔IL-4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-102.1
96.70
血浆(n=8)
92.5-105.5
102.30
细胞培养上清(n=8)
97.9-108.0
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康兔血清血浆细胞培养上清中加入高浓度兔IL-4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.1
91.70
88.6-96.6
92.50
90.0-110.3
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.5
94.60
86.8-108.4
98.40
105.0-115.3
108.50
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