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信号通路
英文名称: Rabbit Interleukin 2 (IL2) ELISA Kit
别名: IL-2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.2pg/mL
种属: 兔
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素2(IL-2)是一个细胞因子家族的成员,其每个成员都有一个四条α螺旋束;该家族还包括IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21。IL-2通过IL-2受体发出信号,这是一个由三条链组成的复合物,被称为α、β和γ。伽马链是所有家族成员共有的 。IL-2受体(IL-2R)α亚基与IL-2结合的亲和力低(Kd~ 10-8 M)。由于IL-2的细胞内链较短,IL-2和CD25单独相互作用不会导致信号转导,但有能力(当与β和γ亚单位结合时)将IL-2R的亲和力提高100倍。IL-2R的β和γ亚单位的异源二聚化对T细胞的信号传导至关重要。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有兔白细胞介素2(IL-2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的兔白细胞介素2(IL-2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中兔的IL-2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.1
1.4
0.88
0.58
0.37
0.27
0.2
0.07
校正OD 值
2.01
1.31
0.79
0.49
0.18
0.18
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康兔血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的兔IL-2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.1
96.60
血浆(n=8)
92.3-106.2
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.6
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康兔血清血浆细胞培养上清中加入高浓度兔IL-2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.3
91.10
88.8-96.0
93.10
90.4-110.6
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.2
94.50
87.6-108.6
98.50
105.2-115.7
108.10
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