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信号通路
英文名称: Rabbit Interferon Gamma (IFNg) ELISA Kit
别名: IFN-γ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.81-500pg/mL
灵敏度: 3.6pg/mL
种属: 兔
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
干扰素(IFN-γ,又称II型干扰素或免疫干扰素)是一种主要由T淋巴细胞和自然杀伤细胞产生的细胞因子。该蛋白与IFN-β或各种IFN-α家族蛋白没有明显的同源性。成熟的IFN-γ以非共价连接的同质体存在。人类IFN-γ具有高度的物种特异性,只在人类和灵长类细胞中具有生物活性。IFN-γ最初是基于其抗病毒活性而被定性的。该蛋白还发挥抗增殖、免疫调节和促进炎症的活性,因此在宿主防御机制中很重要。IFN-γ诱导细胞因子的产生,上调I类和II类MHC抗原、Fc受体和白细胞粘附分子的表达。它调节巨噬细胞的效应功能,影响异型转换并增强B细胞分泌免疫球蛋白的能力。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有兔γ干扰素(IFN-γ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的兔γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中兔的IFN-γ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.25
15.62
7.81
0
OD值
2.15
1.27
0.73
0.45
0.3
0.21
0.17
0.07
校正OD 值
2.06
1.18
0.64
0.36
0.12
0.12
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康兔血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的兔IFN-γ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.5
96.70
血浆(n=8)
92.2-105.8
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.9
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康兔血清血浆细胞培养上清中加入高浓度兔IFN-γ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.6
91.10
88.3-96.1
93.10
90.7-110.2
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.7
94.60
87.8-108.2
98.90
105.3-115.7
108.80
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