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信号通路
英文名称: Mouse Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) ELISA Kit
别名: TNF-α
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.25-80pg/mL
灵敏度: 0.59pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血浆、血清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肿瘤坏死因子α（TNF-α）由中性粒细胞、活化的淋巴细胞、巨噬细胞、NK细胞、LAK细胞、星形胶质细胞内皮细胞、平滑肌细胞和一些转化细胞产生。小鼠TNF-α以膜锚定的形式出现。自然发生的TNF-α形式是糖基化的，但非糖基化的重组TNF-α具有相当的生物活性。据报道，TNF-α的生物活性原生形式是一个三聚体。人类和鼠类的TNF-α在氨基酸水平上显示出大约79%的同源性，并且这两个物种之间有交叉反应。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的TNF-α, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
80
40
20
10
5
2.5
1.25
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠TNF-α , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.6-101.4
96.40
血浆(n=8)
91.0-106.1
102.60
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠血清血浆中加入高浓度小鼠TNF-α , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.8-96.4
90.80
88.7-97.4
93.80
1:04
范围
平均回收率
89.5-104.9
93.60
87.5-108.8
98.20
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