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信号通路
英文名称: Rat Prealbumin (PA) ELISA Kit
别名: PA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: -
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
隐藏域元素占位
详细信息
简介
前白蛋白(Prealbumin,PA)又称转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR),分子量5.4万。它是一个55kDa的同源四聚体,具有二聚体的四元结构,在肝脏、脉络丛和视网膜色素上皮细胞中合成,分别分泌到血液、脑脊液和眼睛中。每个单体是一个富含β片结构的127个残基的多肽。两个单体通过其边缘的β-链结合,形成一个扩展的β三明治。这些二聚体中的两个以面对面的方式进一步结合,产生同源四聚体结构,并在每个四聚体上形成两个甲状腺素结合点。这个由两个T4结合位点组成的二聚体-二聚体界面是较弱的二聚体-二聚体界面,是四聚体解离过程中首先分离的一个界面。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠前白蛋白(PA)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠前白蛋白(PA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
6000
3000
1500
750
375
187.5
93.75
0
OD值
2
1.56
1.14
0.76
0.49
0.33
0.24
0.1
校正OD 值
1.91
1.47
1.05
0.67
0.24
0.24
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PA , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.9
96.40
血浆(n=8)
92.7-106.0
103.20
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.4
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠PA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.2
91.80
88.3-96.4
93.30
90.0-110.9
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.5-102.1
94.40
87.4-108.7
98.90
105.5-114.0
107.60
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